选修一生物3.2月季的花药培养学案（人教版）。

俗话说，磨刀不误砍柴工。作为教师就要根据教学内容制定合适的教案。教案可以让学生们能够在上课时充分理解所教内容，帮助教师有计划有步骤有质量的完成教学任务。优秀有创意的教案要怎样写呢？下面是小编帮大家编辑的《选修一生物3.2月季的花药培养学案（人教版）》，希望对您的工作和生活有所帮助。

课题2　月季的花药培养
1．说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。
2．说出影响花药培养的因素。
3．学习花药培养的基本技术。
4．尝试用月季或其他植物的花药进行培养。
一、被子植物的花粉发育
1．被子植物的花粉是在______中由____________经过______分裂而形成的，花粉是单倍体的生殖细胞。
2．被子植物花粉的发育要经历______________时期、______期和______期等阶段。
二、产生花粉植株的两种途径
1.花药中的花粉――→脱分化――→分化丛芽2.花药中的花粉――→脱分化　――→再分化丛芽――→诱导生根―→移栽
两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中______的种类及其__________。
三、影响花药培养的因素
1．诱导花粉植株成功率高低的主要影响因素是____________与______________。
2．材料的选择与不同植物、同种植物亲本的生理状况，以及花粉发育时期有关。从花药来看，应当选择花期早期的花药；从花粉来看，应当选择______期的花粉；从花蕾来看，应当选择____________的花蕾。此时期的营养状态及生理状态比较好，对离体刺激敏感。
思考：为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
3．亲本植株的生长条件、材料的____________以及__________等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作
1．材料的选取
选择花药时，一般要通过______来确定花粉是否处于适宜的发育时期，此时需要对花粉________进行染色，最常用的方法有__________法和焙花青—铬矾法，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。
2．材料的消毒
通常先将花蕾用体积分数为____________浸泡大约30s，立即取出，在无菌水中清洗。取出后用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分，再用质量分数为______________溶液消毒，最后用无菌水冲洗3～5次。
3．接种和培养
（1）剥离花药：灭菌后的花蕾，要在______条件下除去萼片和花瓣。剥离花药时，一是要注意尽量____________（否则接种后容易从受伤部位产生__________）；二是要彻底去除______，否则不利于__________或________的形成。
（2）接种花药：剥离的花药要立刻接种到培养基上。通常每瓶接种________个花药。
（3）培养：利用的培养基是______培养基，pH为5.8，温度为____℃左右，幼小植株形成后才需要光照。培养20～30d后，花药开裂，长出__________或释放出________。前者还要转移到____________上，以便进一步分化出再生植株；后者要尽快______并转移到新的培养基上。
（4）通过愈伤组织形成的花粉植株，__________的数目常常会发生变化，因而需要作进一步的鉴定和筛选。

答案：一、1.花药　花粉母细胞　减数
2．小孢子四分体　单核　双核　1　4　小孢子四分体　居中　靠边　2　1　生殖　营养
二、1.胚状体
2．愈伤组织　激素　浓度配比
三、1.材料的选择　培养基的组成
2．单核　完全未开放
思考：花瓣松动后，微生物就可能侵入花药。
3．低温预处理　接种密度
四、1.镜检　细胞核　醋酸洋红
2．70%的酒精　0.1%的氯化汞
3．（1）无菌　不损伤花药　愈伤组织　花丝　愈伤组织　胚状体　（2）7～10　（3）MS　25　愈伤组织　胚状体　分化培养基　分开　（4）染色体组
菊花茎的组织培养与月季花药培养技术的异同
二者都是快速、大量繁殖花卉的技术手段。
菊花茎的组织培养月季花药培养
不
同
点外植体细胞类型体细胞生殖细胞
培养结果正常植株单倍体植株
光的要求每日照射12h幼小植株形成后
才需要光照
相同点理论依据、培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同
另外，花药培养的选材非常重要，需事先摸索适宜时期的花蕾；花药裂开后，长出的愈伤组织或释放出的胚状体也要及时更换培养基；花药培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药的培养难度加大。
花药的全能性高于植物组织。另外，花粉植株属单倍体植株，高度不育。如果需要育种，需对花粉植株幼苗进行秋水仙素处理，才能获得正常可育的个体。
题型一花粉的发育
关于被子植物花粉的形成，说法正确的是（）。
A．花粉是花粉母细胞经有丝分裂形成的
B．花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期
C．花粉发育经历双核期时，两个细胞核中的遗传物质并不完全相同
D．花粉母细胞形成花粉粒中精子的过程是一系列减数分裂的过程
解析：花粉是由花粉母细胞经减数分裂形成的；其发育经历了小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。双核期两个细胞核是由一个细胞核经有丝分裂产生的，它们具有完全相同的遗传物质。花粉粒内的生殖细胞再经有丝分裂得到2个精子。
答案：B
题型二花药培养过程
下列有关花药离体培养的说法中，错误的是（）。
A．对材料的选择最常用的方法是焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色
B．材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞溶液或次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗
C．接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照
D．接种的花药长出愈伤组织或胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株
解析：对材料的选择最常用的方法是醋酸洋红法。
答案：A
题型三花药离体培养的应用
下图表示应用植物组织培养技术培育优质玉米的过程。对此过程的相关描述错误的是（）。
A．B→E过程中细胞全能性的高低发生了改变
B．C试管中形成的是高度液泡化的薄壁细胞
C．A植株和F植株体细胞中的染色体组数相同
D．培养出的F植株一般不能直接应用于扩大种植
解析：分化程度越低的细胞，其全能性越高，因此经脱分化获得的细胞全能性高于经再分化获得的细胞的全能性；A是正常植株，而F是经过花粉离体培养获得的单倍体植株，染色体组数减少一半；培养出的F植株是单倍体植株，具有植株弱小、高度不育等特点，因而一般不能直接应用于扩大种植。
答案：C
1．某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离，为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物的一部分器官或组织进行培育，发育成完整植株。进行离体培养时不应采用该植物的（）。
A．茎尖B．子房壁C．叶片D．花粉粒
2．选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是（）。
A．碘液染色法B．焙花青—铬矾法C．醋酸洋红法D．直接镜检法
3．下列说法错误的是（）。
A．镜检选择花药时需用醋酸洋红法将花粉细胞核染成红色或用焙花青—铬矾法染成蓝黑色
B．初花期的花蕾营养状态及生理状态较好，可提高花粉诱导的成功率
C．用于花蕾消毒的药品有体积分数为90%的酒精、无菌水及质量分数为0.1%的氯化汞溶液等
D．灭菌后的花药从除去萼片和花瓣、剥离花药到将花药接种到培养基上，整个过程都需要在无菌条件下进行
4．下列不是影响花药培养因素的是（）。
A．材料的选择和培养基的组成B．亲本植株的生长条件
C．材料的低温预处理以及接种密度D．做实验的时间
5．花粉母细胞经________分裂形成四个单倍体细胞，连在一起，叫________时期。四个单倍体细胞分开，进入________期。然后每个单倍体细胞进行一次________分裂，形成2个细胞，一个是________细胞，另一个是________细胞。生殖细胞再进行一次________分裂，形成2个精子。从理论上讲，这三个细胞遗传物质________，都是体细胞的________，所含基因________。

答案：1．D　花粉粒是由花粉母细胞经减数分裂形成的，细胞内的遗传物质与亲本相比发生了很大变化，所以繁殖名贵花卉，为了防止性状分离，既不能用种子繁殖，也不能用花粉粒进行组织培养。
2．C　在花药离体培养中，确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。花粉细胞核内有染色体，染色体易被碱性染料染成深色，而醋酸洋红为碱性染料。通过染色，可以确定花粉发育时期。
3．C　对花蕾消毒的药品中酒精的体积分数应为70%。
4．D　花药离体培养是在实验室条件下进行的，不受时间的限制。
5．解析：花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。在小孢子四分体时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是生殖细胞，一个是营养细胞。生殖细胞将再分裂一次，形成两个精子。这两个精子的基因型与营养细胞的基因型相同。
答案：减数　小孢子四分体　单核　有丝　营养　生殖　有丝　相同　一半　相同

相关推荐

月季的花药培养导学案

一、学习目标
1.识记被子植物花粉发育的过程
2.通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力
二、学习重点难点
1.被子植物花粉发育过程
2.花药离体培养过程
三、学法指导：小组交流合作一对一检查通关
四、自主学习
一．被子植物花粉发育过程
1．被子植物的花粉是在中由经过分裂形成的。所以，花粉是的生殖细胞。
2．结合教材内容填下列示意图：
[思考1]由此可见，被子植物的花粉的发育要经历时期，期和期等阶段。

[思考2]在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生个精子；在一枚花药中可以产生个花粉。
二．产生花粉植株的两条途径
1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过阶段发育为植株，二是通过阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中的种类及其的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：

3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为，而把从愈伤组织到从芽的过程称为。
4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫，花粉发育而来的胚状体叫，可发育为植物，要使其成为纯合的正常植株，可用处理发育中的幼苗。
三．影响花药培养的因素
1．影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：和等。
2．材料的选择：
①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；
②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉，因为单核期以前的花药，选择单核期以后的花药接种，。；
③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
[思考3]除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？

[思考4]为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？
四．实验设计
1.材料的选择
选择花药时一般通过确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是和，它们分别可以将细胞核染成色和色。
2.材料的消毒

3.接种和培养
（1）．剥取花药：消毒后的花蕾，要在条件下除去花萼、花瓣。在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则还要彻底除去花丝，因为。

选修一生物3.1菊花的组织培养学案（人教版）

一名优秀的教师在教学方面无论做什么事都有计划和准备，作为高中教师就需要提前准备好适合自己的教案。教案可以让学生更好地进入课堂环境中来，帮助高中教师提高自己的教学质量。你知道如何去写好一份优秀的高中教案呢？小编为此仔细地整理了以下内容《选修一生物3.1菊花的组织培养学案（人教版）》，仅供参考，大家一起来看看吧。

课题1　菊花的组织培养
1．说出植物组织培养的基本原理。
2．学习植物组织培养的基本技术。
3．进行菊花或其他植物的组织培养。
一、植物组织培养的基本原理
植物细胞具有________。即植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于______状态时，在一定的__________、______和其他外界条件的作用下，表现出可以发育成____________的能力。
二、植物组织培养的基本过程
1．在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现________的差异，形成这些差异的过程叫做__________。
2．过程
离体的植物细胞、组织、器官――→(脱分化)组织――→(　)丛芽或根等――→(生长)完整的植物体
思考：马铃薯长期种植，产量会降低而且易感染病毒，要想提高马铃薯的产量，培育无病毒的马铃薯应该怎么办？
三、影响植物组织培养的因素
1．材料的选择
植物材料的选择直接关系到实验的成败。植物的种类、材料的______和________________等都会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择____________的茎上部新萌生的侧枝。
2．培养基
植物组织培养需要适宜的培养基，常用的是______培养基，其主要成分包括：__________，如N、P、K、Ca、Mg、S；__________，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；________，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及______等；还常常需要添加______________。
3．植物激素
植物激素中________和____________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。培养基中添加的植物激素的______、________________以及____________等，都会影响实验结果。以生长素和细胞分裂素为例。
使用顺序实验结果
先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞____，
但细胞不____
先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞____________
同时使用______频率提高

生长素/细胞分裂素比值与结果
比值高时有利于____的分化，抑制____的形成
比值低时有利于____的分化，抑制____的形成
比值适中促进__________形成
4.其他影响因素
pH、温度、光照等条件是重要因素，不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培养时，一般将pH控制在______左右，温度控制在________℃，每日用日光灯照射____h。
四、实验操作
1．制备MS固体培养基
（1）配制各种母液。
（2）配制培养基。
（3）灭菌
将分装好的培养基连同其他器械一起进行__________________。
2．外植体消毒
菊花茎段用水冲洗、加洗衣粉用软刷进行刷洗、用流水冲洗，吸干水分。外植体要用体积分数为70%的酒精______，然后用无菌水清洗，吸干表面的水分，再用质量分数为0.1%的氯化汞______，最后用________清洗。
3．接种
所有的接种操作都必须在________旁进行，并且每次使用器械后，都需要用______________。
4．培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期______。
5．移栽
6．栽培

答案：一、全能性　离体　营养物质　激素　完整的植株
二、1.稳定性　细胞分化
2．愈伤　再分化
思考：长期进行无性繁殖的植物，只有根尖和茎尖中几乎无病毒，因此可利用植物组织培养获得无病毒的马铃薯植株。
三、1.年龄　保存时间的长短　未开花植株
2．MS　大量元素　微量元素　有机物　蔗糖　植物激素
3．生长素　细胞分裂素　浓度　使用的先后顺序　用量的比例　分裂　分化　既分裂也分化　分化　根　芽　芽　根　愈伤组织
4．5.8　18～22　12
四、1.高压蒸汽灭菌
2．消毒　消毒　无菌水
3．酒精灯　火焰灼烧灭菌
4．消毒
1.细胞分化与植物细胞的全能性
多细胞生物体，一般是由一个受精卵通过细胞的增殖和分化发育而成的。细胞分裂只能繁殖出许多含有相同遗传物质的细胞，只有经过细胞分化才能形成不同的组织，进一步形成各种器官、系统，从而完成生物的个体发育过程。当细胞分化开始时，受遗传因素和环境因素的调节，不同细胞的不同基因会在特定的时间、空间被激活，活化一段时间后有些基因的活动停止，而有些基因还在继续活动，从而产生了特定的蛋白质（即基因有选择性的表达），进而产生了不同的组织，也就是在个体发育中相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上发生了稳定性差异——细胞分化，这是发生在生物体一生中的一种持久变化，当然胚胎时期达到最大限度。一般来说，分化了的细胞将一直保持分化后的状态，直到死亡。
由于体细胞大多是通过有丝分裂繁殖而来的，一般已经分化的细胞仍有一套和受精卵相同的染色体，含有与本物种相同的DNA分子。因此，已分化的细胞具有发育成完整新个体的潜能，即全能性。在合适的条件下，有些分化的细胞具有恢复分裂、重新分化发育成完整新个体的能力。植物细胞的全能性比较强，动物细胞的全能性受到了限制，特别是一些高度特化的动物细胞，很难用它培养成一个新个体，但它的细胞核中仍有保持物种遗传性的全部遗传物质，保持着全能性，例如已取得成功的克隆羊——多利就是一例。
2.愈伤组织
愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。它容易与根尖、茎尖的分生组织发生混淆。可以通过下表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同。
组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向
根尖
分生组织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织
愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成
新个体
相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖
3.污染的预防
污染就是指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。
污染有两种类型，一种是细菌污染一般是由接种人员造成的，如未戴口罩，接种时说话，或手及器械消毒不严等。另一种是真菌污染可能是由植物材料灭菌不当造成的。
可以通过以下措施做好预防。
（1）防止外植体带菌。①选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春秋为宜，优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。②在室内或无菌条件下进行预培养。③外植体严格消毒。做消毒效果试验，多次消毒和交替消毒。
（2）保证培养基及接种器具彻底灭菌。①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口。②检查封口膜是否有破损。③扎瓶口要位置适当、松紧适宜。④保证灭菌时间和高压锅内温度。⑤接种工具使用前彻底灭菌。⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。
（3）操作人员严格遵守无菌操作规程。如一定要规范着装，操作过程中不说话等。
（4）保证接种与培养环境清洁。①污染瓶经高压灭菌后再清洁。②接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒。③定期对培养室消毒、防止高温。
对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。消毒用过的有毒药品应收集后统一交给有关专业部门处理，以免引起环境污染。
一旦发现培养材料被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌后，再打开培养瓶进行清洗。
题型一细胞的全能性
下列实例中能体现细胞全能性的是（）。
①用培养基培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株②植物用种子进行繁殖　③用单个烟草组织培育出了可育的完整植株
A．①②B．①③C．②③D．①②③
解析：①和③都属于已分化的细胞经过培养形成可育的植株，体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代，实际上是由一个受精卵，通过细胞的增殖和分化发育成新个体，是由未经分化的细胞（受精卵）发育成新个体的过程，因此不能体现细胞全能性。
答案：B
题型二植物细胞表达全能性的条件
植物细胞表现出全能性的必要条件是（）。
A．给予适宜的营养和外界条件
B．导入其他植物细胞的基因
C．脱离母体后的具有完整细胞核的细胞或组织，给予适宜的营养和外界条件
D．将成熟筛管细胞的细胞核移植到去核卵细胞中
解析：在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官，这是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。当植物细胞脱离母体后，在一定的营养物质、激素和其他适宜的外界条件的作用下，植物细胞就可以表现出全能性。
答案：C
反思领悟：植物细胞表达全能性的条件：一是离体的组织或细胞；二是需要一定的激素、营养及其他适宜条件；三是具有完整细胞核的细胞。
题型三植物组织培养的过程及影响因素
（2010安徽理综）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：
外植体――→①愈伤组织――→②芽根―→植株
请回答下列问题。
（1）微型繁殖培育无病毒草莓时，一般选取____________作为外植体，其依据是________________。
（2）在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和____________，在配制好的培养基中，常常需要添加____________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2～5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是____________。
（3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是____________________________________________。
解析：（1）植物组织培养时常采用根尖或茎尖部位，原因是该部位含病毒极少，甚至无病毒。
（2）MS培养基的成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培养也应注意无菌操作。
（3）生长素用量比细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化，比值高时，有利于根的分化。
答案：（1）茎尖（或根尖）　茎尖（或根尖）病毒极少，甚至无病毒　（2）有机物　植物激素　外植体消毒不彻底　（3）培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低
1．下列关于细胞分化的叙述，错误的是（）。
A．细胞分化是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中
B．细胞分化在胚胎时期达到最大限度
C．随着细胞分化的进行，细胞中的遗传物质种类会发生变化
D．高度分化的动物细胞的细胞核保持着全能性
2．下列有关植物组织培养的叙述，错误的是（）。
A．植物组织培养的原理是细胞的全能性B．主要包括脱分化和再分化两个阶段
C．外植体形成愈伤组织的过程需要阳光D．植物组织培养的过程中要求无菌操作
3．下列关于愈伤组织形成过程的正确叙述是（）。
A．愈伤组织的形成是离体的植物细胞分化的结果
B．愈伤组织的形成是离体的植物细胞分裂的结果
C．愈伤组织的形成是离体的动物细胞分化的结果
D．愈伤组织的形成是离体的动物细胞分裂的结果
4．下列关于接种时应注意的事项，全部正确的是（）。
①接种室要消毒　②无菌操作　③接种时可以谈话　④外植体如茎段、茎尖可随机放入培养基　⑤接种时要防止交叉污染　⑥接种完立刻盖好瓶口
A．①②③④B．①②③④⑤⑥C．③④⑤⑥D．①②⑤⑥
5．在离体的植物组织、器官或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要下列哪些条件？（）
①消毒灭菌　②一定浓度的植物激素　③适宜的温度　④充足的光照　⑤充足的养料
A．①③④⑤B．②③⑤C．①②③D．①②③⑤

答案：1．C　细胞分化不会使遗传物质种类发生变化，它的实质是遗传物质在时间和空间上有选择性地表达。
2．C　植物组织培养是指离体的植物细胞、组织或器官在无菌操作下经脱分化和再分化形成完整植物体的过程，其原理是植物细胞的全能性。在脱分化形成愈伤组织的过程中，恒温箱的门应该关闭，不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长得更快。
3．B　愈伤组织只存在于植物细胞；离体的植物组织细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。
4．D　整个接种过程必须在无菌条件下进行，不能谈话，防止呼吸产生污染，因此操作过程应禁止谈话，并戴口罩；接种的外植体放入培养基时注意将形态学下端插入，而且分布均匀，不能随机放入，以保证必要的营养和光照条件。
5．D　离体的植物相关结构在形成愈伤组织的过程中不需要光照，因为该过程无法进行光合作用，其营养物质来自培养基。

选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）

俗话说，居安思危，思则有备，有备无患。教师在教学前就要准备好教案，做好充分的准备。教案可以让学生们能够更好的找到学习的乐趣，减轻教师们在教学时的教学压力。教案的内容具体要怎样写呢？为此，小编从网络上为大家精心整理了《选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）》，仅供您在工作和学习中参考。

课题1　微生物的实验室培养
问题导学
一、培养基和无菌技术
活动与探究1
1．配制培养基所用的琼脂的成分和作用是什么？
2．为什么有的微生物培养基中需加入特殊营养物质？
3．培养基是如何分类的？
4．消毒和灭菌的原理、实质相同吗？
5．请判断以下材料或用具是需要消毒还是灭菌。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿。
（2）玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。
（3）实验操作者的双手。
迁移与应用1
灭菌的标准是（）。
A．杀死所有的病原微生物
B．杀死物体表面所有的微生物
C．杀死所有的微生物，包括芽孢和孢子
D．使病原菌不生长
1．培养基的类型及应用
标准培养基类型配制特点主要应用
物
理
性
质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，
鉴定，计数
半固体培养基加入琼脂较少菌种保藏
液体培养基不加入琼脂工业生产，
连续培养
化
学
成
分天然培养基含化学成分不明
确的天然物质工业生产
合成培养基培养基成分明确分类鉴定
目
的
用
途鉴别培养基添加某种指示剂
或化学药剂菌种的鉴别
选择培养基添加（或缺少）
某种化学成分菌种的分离
注：培养基中的营养物质是维持机体生命活动，保证生殖、发育所需的外源物质。在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类；微生物共有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质。
2．实验室常用的消毒或灭菌方法
灭菌或消毒种类主要方法应用范围
灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧接种环、接种针及试管口等
干热灭菌干热灭菌箱内，在160～170℃下加热1～2h玻璃器皿、金属用具等
巴氏消毒70～75℃下煮30min牛奶、啤酒等一些不耐高温的液体
高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅内，100kPa，121℃下持续加热15～30min培养基等
紫外线消毒30W紫外线灯照射30min接种室空气等
化学药物消毒用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，手术器械、玻璃器皿等消毒
二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
活动与探究2
1．用流程图表示该培养基的制备过程。
2．如果倒平板过程中，皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？
3．培养基灭菌后，需要冷却至50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
4．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
迁移与应用2
关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，下列叙述错误的是（）。
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10分钟后将平板倒过来放置
1．由于不同的微生物生长对pH的需求不同，如培养霉菌时需将培养基调至酸性，培养细菌时需将培养基调至中性或微碱性，所以在培养基各组分溶化后需要先用酸或碱将pH调至微生物生长的最适宜条件，再进行灭菌处理。
2．培养基需要冷却至50℃时才能开始倒平板的原因：琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。
三、纯化大肠杆菌
活动与探究3
1．纯化大肠杆菌时需要接种，请列举接种的技术并说出它们共同的核心操作。
2．什么叫菌落？如何从“菌落”角度评价平板划线法或稀释涂布平板法的成功性？
3．学习教材第18页平板划线操作，思考下列问题。
（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？
（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
（3）平板划线时不能划破培养基的原因是什么？
4．学习教材第19页稀释涂布平板操作，思考下列问题。
（1）稀释涂布平板法的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线法与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第二步应如何进行无菌操作？
（2）操作结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？
迁移与应用3
下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是（）。
A．只在操作前将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
1．接种方法的比较及分析
（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离。
（2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离。
（3）稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
2．结果评价
如果培养基上生长的菌落在颜色、形状、大小上基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，重新操作。
答案：
课前预习导学

一、1．生长繁殖
2．（1）液体　（2）液体　琼脂　琼脂固体　固体　菌落
3．（1）水　碳源　氮　（2）pH　氧气　维生素　酸性　中性　微碱　无氧
预习交流1：（1）提示：构成细胞的基本元素有C、H、O、N4种，由此推测培养基应含有提供C的物质（碳源）、提供N的物质（氮源）、提供H和O的物质（H2O）。
（2）提示：还有P、S、K、Ca、Mg等，据此推测培养基中应含有提供P、S、K、Ca、Mg等元素的物质（无机盐）。
（3）提示：自养微生物的碳源是含碳的无机物，主要是CO2、NaHCO3等，而异养微生物的碳源则是含碳的有机物，如糖类、脂肪酸等。
二、1．外来杂菌
2．物理　化学　一部分　芽孢　孢子
3．理化因素　内外　芽孢　孢子
4．（1）空间　衣着　手　（2）器皿　接种用具　培养基　（3）酒精灯火焰　（4）灭菌　周围的物品
5．（1）巴氏消毒　（2）灼烧　（3）干热　（4）100　121　15～30　（5）紫外线　化学药物
预习交流2：（1）提示：被褥、鞋袜要常晒；肉制品储存时用盐腌等。
（2）提示：家畜阉割后，要在其伤口涂抹一些酒精或白酒；初冬杨树树干涂刷生石灰水等。
（3）提示：打针时，注射部位要用酒精棉球擦洗；家畜阉割后，要在其伤口处涂抹一些酒精。
三、2．容易吸潮
3．琼脂糊底
4．高压蒸汽　干热
5．50　酒精灯火焰
四、1．平板划线法　稀释涂布平板法
2．一个　子细胞群体
五、临时保藏　甘油管藏
课堂合作探究

活动与探究1：
1．提示：琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基时作为凝固剂。
2．提示：因为有的微生物缺乏合成这些物质所需的酶或合成能力有限。
3．提示：按物理性质分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基；按化学成分分为天然培养基和合成培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
4．提示：原理相同，都是使微生物的蛋白质变性，借此杀死微生物；实质不同，灭菌可杀死物体内外的全部微生物（包括芽孢和孢子），而消毒仅杀死部分微生物。
5．提示：（1）（2）需要灭菌，（3）需要消毒。
迁移与应用1：C　解析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
活动与探究2：
1．提示：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
2．提示：不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基，因此，最好不要用这种平板培养微生物。
3．提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
4．提示：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
迁移与应用2：A　解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却几分钟后还需倒置。
活动与探究3：
1．提示：菌种的接种技术包括平板划线操作、稀释涂布平板操作、斜面接种、穿刺接种等，它们共同的核心操作是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
2．提示：在培养基上由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体叫菌落。平板划线法或稀释涂布平板法如能在培养基上得到单个的菌落就是成功的。
3．（1）提示：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后需要灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者。
（2）提示：以免接种环温度太高杀死菌种。
（3）提示：一是划破培养基会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是即使在划破处有单个细胞，也无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
4．（1）提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适，吸管头不要接触任何其他物体，吸管要在酒精灯火焰周围等。
（2）提示：培养未接种培养基的作用是对照，未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的。若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。
迁移与应用3：D　解析：操作前后都要对接种环进行灭菌；划线操作须在火焰旁进行，而不是火焰上；所有的划线区都有可能得到所需菌落。
当堂检测
1．某培养基的配方表如下，下列叙述正确的是（）。
成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水
含量10g10g2g0.4g0.065g定容至1000mL
A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基
B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
C．该培养基缺少提供生长因子的物质
D．培养基调节好pH后就可以接种菌种
答案：B　解析：此配方中，葡萄糖主要作碳源，蛋白胨作氮源，同时还可提供生长因子。从用途看该培养基为鉴别培养基。在调节好pH后还需灭菌，然后才可用于菌种的培养。
2．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。但一般都需要水、碳源、氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述中，正确的是（）。
A．氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素
B．有些碳源也可以给微生物的生长提供能源
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，所以无机盐越多越好
D．固体培养基中不含水分
答案：B　解析：含氮的有机物既可给微生物提供氮元素，也可给微生物提供能源；含碳的有机物既可给微生物提供碳元素，也可给微生物提供能源。微生物生长需要无机盐，但不是越多越好，过多会导致培养基渗透压过高，使微生物因失水过多而不能生存。固体培养基中也含有水分，因为含有凝固剂琼脂，所以呈固态。
3．关于灭菌和消毒的理解不正确的是（）。
A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是完全相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
答案：B　解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
4．下列有关平板划线操作的说法正确的是（）。
A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养
答案：D　解析：使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中对接种环也要灭菌；含菌种的试管在打开后和塞棉塞前都要通过酒精灯火焰灭菌；要分区域多次划线，第二次划线要从第一次划线的末端开始。
5．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）。
A．一个细菌，液体培养基
B．许多细菌，液体培养基
C．一个细菌，固体培养基
D．许多细菌，固体培养基
答案：C　解析：菌落是由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，因此标准菌落应来源于最初的一个细菌。产生菌落的培养基不可能是液体培养基。
绘制牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备及大肠杆菌纯化的流程图。

选修一生物1.2腐乳的制作学案（人教版）

课题2　腐乳的制作
1．以制作腐乳为例了解传统发酵技术的应用。
2．说明腐乳制作过程的科学原理。
3．设计并完成腐乳的制作。
4．分析影响腐乳品质的条件。
一、腐乳制作的原理
1．原理
多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是______，它是一种丝状______，分布广泛，生长迅速，具有发达的________。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的________分解成小分子的____和________；脂肪酶可将______水解为______和______。在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成风味独特的腐乳。
2．菌种来源
自制腐乳利用的毛霉来自于空气中的________。现代的腐乳生产是在严格______的条件下，将优良的______菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免________________，保证产品的质量。
3．条件
温度应控制在________，并保持一定湿度。
二、腐乳制作的实验流程
让豆腐上长出毛霉→________→__________→密封腌制。
思考：豆腐乳吃起来感觉有点咸，你知道是什么原因吗？这样有什么特殊作用吗？
三、操作提示
1．控制好材料的用量
（1）用盐腌制时，注意控制盐的用量。盐的浓度过低，不足以抑制________，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高，会影响腐乳的口味。
（2）卤汤中酒精含量应控制在______左右。酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会______；酒精含量过低，不足以____________，可能导致豆腐______。
2．防止杂菌污染
（1）用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水______。
（2）装瓶时，操作要迅速小心。放好豆腐，加入卤汤后，要用胶条密封瓶口。封瓶时，最好将瓶口通过__________，防止瓶口被污染。

答案：一、1.毛霉　真菌　白色菌丝　蛋白质　肽　氨基酸　脂肪　甘油　脂肪酸
2．毛霉孢子　无菌　毛霉　其他菌种的污染
3．15～18℃
二、加盐腌制　加卤汤装瓶
思考：豆腐乳是用盐腌制的，可以起到防止其他杂菌生长等作用。
三、1.（1）微生物生长　（2）12%　延长　抑制微生物生长　腐败
2．（1）消毒　（2）酒精灯的火焰
1．材料的选择
用来制作腐乳的豆腐含水量最好在70%左右，水分过多则腐乳不易成形，含水量不当会影响毛霉菌丝的深入程度。
水分测定方法如下：
精确称取经研钵研磨成糊状的样品5～10g（精确到0.02mg），置于已知重量的蒸发皿中，均匀摊平后，在100～105℃电热干燥箱内干燥4h，取出后置于干燥器内冷却至室温后称重，然后再烘30min，直至所称重量不变为止。
样品水分含量（%）计算公式如下：
样品水分含量（%）＝（烘干前容器和样品质量－烘干后容器和样品质量）/烘干前样品质量
2．用盐腌制的目的
（1）调味。一定的咸度能刺激人的味觉。
（2）防腐。防止杂菌污染，避免豆腐腐败。正如日常生活中，一些地区的人们通常将鱼和肉腌制起来长时间保存，其原因是在高浓度盐水溶液中细菌脱水死亡。
（3）降低豆腐含水量，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。
（4）抑制蛋白酶继续起作用，稳定其鲜味和香味。
腌制时要分层加盐，并随层数加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，以防止杂菌从瓶口进入。
3．制作过程中影响腐乳品质的因素
（1）菌种：菌种是生产发酵的关键，如果菌种退化则表现出生化功能的变化，如水解速率、代谢产物等都会发生变化，从而影响品质，因而要选择优良的菌种。
豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，就是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形，而对人体无害。
（2）杂菌：如有杂菌污染则直接影响产品的色、香、味。因而要关注培养湿度的控制，盐、酒和香辛料的用量，以及用具的消毒和密封等方面。
（3）温度：温度过低或过高会影响毛霉菌丝的生长，从而影响发酵的进程和发酵质量。如温度过低，则菌丝生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度过高，菌丝易老化和死亡，影响品质。
要严格控制温度，因为15～18℃不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长，而适于毛霉慢慢生长。在合适的条件下，一般2d后，毛霉就开始生长，约5d后，豆腐表面就会长满直立菌丝（即长白毛）。
（4）发酵时间：时间过短，发酵不充分，如蛋白质未完全水解，这样在加盐后豆腐脱水，蛋白质变性，就会变硬；时间过长，豆腐会软化不易成形，从而影响腐乳的口味。
（5）调味品：加入的各种酒类、糖类等辅料的多少也对口感有重要影响。
酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。
题型一腐乳制作的原理
在豆腐的发酵过程中，起主要作用的是（）。
A．曲霉B．酵母C．毛霉D．醋酸菌
解析：腐乳的发酵是多种微生物的协同作用，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。曲霉是酿制酱油所用的主要菌种，在酿制腐乳中不占主导地位，但制作红方时需要加入红曲，使其呈现深红色。
答案：C
腐乳味道鲜，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分是（）。
A．无机盐、水、维生素B．氯化钠、氨基酸、甘油和脂肪酸
C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸D．蛋白质、脂肪、氯化钠、水
解析：豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪。在毛霉等多种微生物分泌的蛋白酶和脂肪酶的作用下，豆腐被分解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸等营养成分。
答案：C
题型二影响腐乳品质的条件
下列关于腐乳制作的描述中，错误的是（）。
A．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与
B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳
C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长
D．密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染
解析：含水量在70%左右的豆腐适于作腐乳，是因为易成型、有利于毛霉的生长繁殖；含水量过高，腐乳不易成型。
答案：B
反思领悟：盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。香辛料和酒可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
1．毛霉属于（）。
A．真菌B．病毒C．细菌D．植物
2制作腐乳的正确流程是（）。
①加卤汤装瓶　②让豆腐长出毛霉　③加盐腌制　④密封腌制
A．①②③④B．②③①④C．①③②④D．①④③②
3．下列有关毛霉的作用，正确的是（）。
①将多糖分解成葡萄糖　②将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸　③将脂肪水解成甘油和脂肪酸　④将核酸分解成核苷酸
A．①②B．②③C．③④D．①④
4．豆腐坯用食盐腌制，其作用是（）。
①渗透盐分，析出水分　②给腐乳以必要的咸味　③防止毛霉继续生长和污染的杂菌繁殖　④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶
A．①②③B．②③④C．①③④D．①②③④

答案：1．A　毛霉属于霉菌，霉菌和酵母菌均为真菌，属于真核生物。细菌属于原核生物。
2．B　
3．B　腐乳制作过程中，毛霉可产生多种不同的酶，以利用和分解豆腐中的营养物质。其中，主要的酶是水解酶类，如蛋白酶将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解成甘油和脂肪酸等。
4．D　豆腐坯用食盐腌制可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物生长，避免腐败变质，能够浸提毛霉菌丝上的蛋白酶。