生物选修一5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段学案（人教版）。

俗话说，凡事预则立，不预则废。教师要准备好教案，这是教师需要精心准备的。教案可以让学生们充分体会到学习的快乐，帮助教师有计划有步骤有质量的完成教学任务。你知道怎么写具体的教案内容吗？以下是小编收集整理的“生物选修一5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段学案（人教版）”，欢迎大家阅读，希望对大家有所帮助。

课题2　多聚酶链式反应扩增DNA片段
问题导学
一、PCR的原理
活动与探究1
1．细胞内DNA复制需要的基本条件有哪些？该条件在DNA复制中起何作用？
2．什么是引物？它有什么特点？用于PCR的引物一般长度是多少？
3．讨论：DNA合成的方向有什么特点？两条子链的合成起始于DNA的同一端吗？
4．PCR技术中，高温能使DNA双链解旋，但也会导致DNA聚合酶失活，如何解决？
迁移与应用1
PCR过程中起催化作用的酶是（）。
A．解旋酶　B．RNA聚合酶
C．TaqDNA聚合酶D．DNA连接酶
细胞内DNA复制与PCR技术的比较
细胞内DNA复制PCR
不
同
点解旋解旋酶催化，部分解旋解链95℃高温解旋解链，双链完全分开
酶解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶TaqDNA聚合酶
能量ATP不加
温度体内温和条件95℃→55℃→72℃
特点整个DNA复制，只在分裂间期复制一次目的基因片段，按需要无限扩增
相同点①需DNA模板；②需脱氧核苷酸作原料；③子链延伸方向都是从5′端到3′端；④都遵循碱基互补配对原则，半保留复制
注：解旋酶的作用是使DNA两条链的氢键断开，而DNA聚合酶都是催化形成磷酸二酯键的。
二、PCR的反应过程
活动与探究2
1．PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为哪几步？
2．PCR循环之前，常要进行一次预变性，预变性的目的是什么？
3．PCR循环过程中，变性温度设置94℃，时间设置30s的原因是什么？
4．PCR缓冲液相当于细胞内的什么成分？
5．当PCR反应体系的温度由变性后缓慢冷却到50℃左右时，引物与模板可结合，而解开的两个DNA模板链能够重新结合吗？为什么？
6．PCR过程中的DNA聚合酶能对最初的DNA模板进行完整的复制吗？为什么？
7．决定PCR反应特异性的原因有哪些？
迁移与应用2
利用PCR技术扩增某DNA片段得到下图所示产物，则该产物至少经过几次循环才能产生？（）
A．1次B．2次
C．3次D．4次
1．PCR反应过程图解
（1）变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图：
（2）复性：系统温度下降至55℃时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图：
（3）延伸：当系统温度上升至72℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸（A、T、G、C）在DNA聚合酶的作用下，据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图：
2．PCR过程的温度条件和时间控制
变性复性延伸
预变性94℃，5min——
30次94℃，30s55℃，30s72℃，1min
最后一次94℃，1min55℃，30s72℃，1min
三、PCR实验操作和结果分析评价
活动与探究3
1．讨论PCR实验过程中有哪些注意事项。
2．如何判断DNA扩增成功？
迁移与应用3
PCR实验中使用的微量离心管、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（）。
A．反复洗涤B．用酒精擦洗
C．高压灭菌D．在－20℃下储存
1．PCR体外扩增DNA片段的实验流程
准备　按照PCR反应体系的配方将所需试剂摆放于实验桌上
移液　用微量移液器按照配方在微量离心管中依次加入各组分
混合　盖严离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管壁
离心　将微量离心管放在离心机上，离心约10s。目的是使反应液集中在离心管底部
反应　将离心管放入PCR仪中，设置程序进行反应：变性―→复性―→延伸
2．实验中DNA含量的测定
DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，峰值的大小与DNA的含量有关。可以利用DNA这一特点进行DNA含量的测定，具体方法如下：
（1）稀释：2μLPCR反应液，加入98μL蒸馏水，即将样品进行50倍稀释
（2）对照调零：以蒸馏水作为空白对照，在波长260nm处，将紫外分光光度计的读数调节至零
（3）测定：取DNA稀释液100μL至比色杯中，测定260nm处的光吸收值
（4）计算：DNA含量（μg/mL）＝50×（260nm的读数）×稀释倍数
3．几种PCR方法
有反转录PCR、扩增未知序列的PCR、致突变PCR、定量PCR、免疫PCR等方法，PCR还可与其他方法联合使用，有很多新的联合法。
（1）反转录PCR
反转录PCR就是把RNA提取后反转录成互补DNA，并以此互补DNA链为模板进行的PCR反应。通常用于检测某种RNA是否被表达，或者比较其相对表达水平。
（2）实时荧光定量PCR
所谓的实时荧光定量PCR就是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物的荧光信号的实时检测，从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR的进行，PCR产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线。
（3）免疫PCR
免疫PCR是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。
答案：
课前预习导学

一、1．体外　DNA　DNA拷贝
2．解旋　DNA母链　脱氧核苷酸　DNA聚合
预习交流1：提示：DNA聚合酶不能从头合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。因此，DNA复制需要引物，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。
3．80～100℃　双螺旋　双链　变性　降低　双链
4．缓冲　DNA　两条模板链　引物　脱氧核苷酸　TaqDNA聚合　温度
二、1．变性　90℃　解旋　95
2．复性　50℃　两种　碱基互补配对　55
3．延伸　72℃　TaqDNA聚合酶
预习交流2：（1）提示：DNA分子首先在解旋酶的作用下解旋，然后以解开的每一段母链为模板，在DNA聚合酶等酶的作用下合成与母链碱基互补的一段子链，随着模板链解旋过程的进行，新合成的子链也不断延伸，同时，每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。
（2）提示：PCR在高温条件下（90～100℃）解旋，而细胞内的DNA在解旋酶的作用下解旋。
三、1．温度　3　恒温水浴锅
2．塑料管　0.5mL
3．微量移液器
四、1．外源DNA　高压灭菌
2．分装成小份　－20℃
3．枪头　更换
预习交流3：提示：是用塑料加工制作的。
课堂合作探究

活动与探究1：
1．提示：细胞内DNA复制需要的基本条件和作用分别是：（1）解旋酶：打开DNA双链。（2）DNA母链：提供DNA复制的模板。（3）4种脱氧核苷酸：合成子链的原料。（4）DNA聚合酶：催化合成DNA子链。（5）引物：使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。
2．提示：引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸。
3．提示：（1）DNA的羟基末端称为3′端，磷酸基团的末端称为5′端，且DNA的一条链为3′→5′，另一条互补链为5′→3′，即DNA的两条链是反向的。（2）DNA合成的方向总是从子链的5′端向3′端延伸（即沿母链的3′→5′），所以两条子链的合成分别起始于DNA的两端。
4．提示：寻找和使用耐高温的DNA聚合酶。
迁移与应用1：C　解析：PCR技术解旋过程是利用了95℃高温使DNA变性解旋；RNA聚合酶是转录过程所需的酶；DNA连接酶是基因工程和DNA体内复制所需的酶；PCR技术延伸中所用的酶是TaqDNA聚合酶。
活动与探究2：
1．提示：每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。
2．提示：预变性的目的是增加大分子模板DNA彻底变性的概率。
3．提示：变性温度过低，解链不完全导致DNA不能扩增，变性温度过高影响酶的活性；在此温度条件下如果处理时间过长，将会导致酶的钝化。
4．提示：由于缓冲液为DNA的复制提供场所，相当于细胞内DNA复制的场所，所以缓冲液相当于核基质。
5．提示：不能。（1）模板DNA链比引物长得多而且复杂得多，不易重新结合。（2）引物和模板之间的碰撞机会远远高于两个DNA模板链之间的碰撞机会。（3）加入的引物的量较大，而模板数量少。
6．提示：不能。第一次循环时，只能从引用结合的部位开始。由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，由引物Ⅱ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅰ结合，进行DNA的延伸之后，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。
7．提示：（1）待扩增DNA片段的特异性。（2）引物与模板特异性地结合。（3）碱基互补配对原则。（4）耐高温的TaqDNA聚合酶的催化作用具有专一性。
迁移与应用2：B　解析：PCR技术中，第一次循环产生两个DNA分子，每个DNA分子只有一条链具有引物。第二次循环产生四个DNA分子，其中两个DNA分子只有一条链具有引物，另两个DNA分子两条链都具有引物。
活动与探究3：
1．提示：（1）避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前必须进行高压灭菌。
（2）缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。
（3）每添加一种反应成分，更换一个移液器的枪头。
（4）混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。
2．提示：（1）教材中的方法，可以通过计算DNA含量来评价扩增的效果。
（2）电泳检测的方法，可以通过在紫外线下直接观察DNA带的分布及粗细程度来评价扩增的效果。
迁移与应用3：C　解析：为了避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃下储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。
当堂检测
1．下列有关PCR的描述，不正确的是（）。
A．是一种酶促反应
B．引物决定扩增的特异性
C．扩增的对象是氨基酸序列
D．扩增的对象是DNA序列
答案：C　解析：PCR是特异扩增两个引物间的脱氧核苷酸序列，而不是氨基酸序列。
2．引物长度通常为20～30个核苷酸的一段（）。
A．DNAB．RNA
C．DNA或RNAD．双链DNA
答案：C　解析：DNA复制过程均需要引物的参与，引物是一小段RNA或DNA。
3．PCR利用了DNA的什么原理，来控制DNA的解聚与结合？（）
A．特异性B．稳定性
C．热变性D．多样性
答案：C　解析：PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。
4．PCR过程中的复性是指（）。
A．在90℃以上时，两条DNA单链通过碱基互补配对形成DNA双螺旋
B．在50℃左右，两条DNA单链通过碱基互补配对形成DNA双螺旋
C．在90℃以上时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
D．在50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
答案：D　解析：PCR过程中的复性发生在50℃左右的低温条件下，指引物与单链DNA的结合，不是两条单链DNA的结合。
5．标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）。
A．94℃、55℃、72℃B．72℃、50℃、94℃
C．50℃、94℃、72℃D．80℃、50℃、72℃
答案：A　解析：当温度上升到90℃以上时，作为模板的双链DNA解旋成为单链DNA，称之为变性；当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，称为复性；当温度回升到72℃左右时（TaqDNA聚合酶的最适反应温度），在单链上4种脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则连接在引物之后，使引物链延伸，形成互补的DNA双链，称为延伸。
用流程图表示PCR的操作步骤。

延伸阅读

6.2DNA片段的扩增——PRC技术

6.2DNA片段的扩增——PRC技术★课题目标

（一）知识与技能

1、了解PCR技术的基本操作

2、理解PCR的原理

3、讨论PCR的应用

（二）过程与方法

在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件

（三）情感、态度与价值观

通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神

★课题重点

PCR的原理和PCR的基本操作

★课题难点

　PCR的原理

★教学方法

启发式教学★教学工具

多媒体课件

★教学过程（一）引入新课

在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。

（二）进行新课

1．基础知识

PCR技术扩增DNA的过程，与细胞内DNA复制过程类似：

1．1细胞内DNA复制条件分析：

条件

组分

作用

模板

DNA的两条单链

提供复制的模板

原料

四种脱氧核苷酸

合成DNA子链的原料

酶

解旋酶

DNA聚合酶

打开DNA双螺旋

催化合成DNA子链

能量

ATP

为解螺旋和合成子链供能

引物

RNA

为DNA聚合酶提供合成的3’端起点

1．2细胞内DNA复制过程

（1）DNA的反向平行结构：（结合教材图5－6）

核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图）

由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。

DNA双螺旋结构的反向平行结构：

（2）DNA的复制过程:

解旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。

引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。

DNA聚合酶结合：

子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。

后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链）

子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。

感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合，它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能，因此RNA的合成不需要引物，而是从头合成的，它的错配可能性较大，在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I删去，代之以高保真的DNA链。

［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？

DNA双螺旋结构提供模板；碱基互补配对；DNA聚合酶的复查功能。

［思考］细胞内哪些物质是从头合成的？RNA合成、蛋白质合成。

1．3DNA分子复制的人工控制

解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。

恢复螺旋：在50℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。

复制条件：缓冲液,DNA模板,四种脱氧核苷酸,热稳定DNA聚合酶,两种引物。

反应场所：PCR仪（自动温度周期性调节）。

［思考］缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）

4．PCR的反应过程

变性

复性

延伸
变性：在95℃时DNA解旋

复性：在50℃时引物与DNA单链结合

延伸：在72℃时合成DNA子链（两个引物间的序列）2．实验操作

2．1PCR反应体系：缓冲液、DNA模板，四种脱氧核苷酸原料、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物，水

2．2实验操作步骤

2．3按照PCR反应体系配方配制反应液；

（2）将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管（0.5mL）中；

（3）将微量离心管放到PCR仪中；

（4）设置PCR仪的工作参数。

（5）DNA在PCR仪中大量扩增。

2．4水浴法：将微型离心管依次在95℃、55℃、72℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。

3．实验注意事项

3．1避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。

3．2缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。

3．3每添加一种反应成分，更换一个移液器的枪头。

3．4混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。

4．结果分析与评价

4．1反应液稀释：取2LPCR反应液，添加98L蒸馏水；2．分光光度计调零：将100L蒸馏水添加到比色杯中，在260nm处将分光光度计调整读数为零。

4．2将100L反应稀释液倒入比色杯中，测定在260nm处的光吸收值。

4．3计算：DNA含量＝50×光吸收值×稀释倍数

（三）课堂总结、点评

PCR原理

DNA的复制需要酶、原料、能量、引物

DNA的变性和复性受温度影响

PCR过程

变性

复性

延伸

操作步骤

配制PCR反应体系

移入离心管

放入PCR

设置工作参数

DNA扩增

测定含量

稀释

调零

测定并读数

计算
（四）实例探究

例1在（）的温度范围内，DNA的双螺旋结构解开

A.10－20℃B.80－100℃C.20－30℃D.40－60℃

解析：蛋白质大多不能忍受60－80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。

答案：B

例2关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）

A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5’端延伸DNA链

B.DNA复制不需要引物

C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合

D.DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸

解析：由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3’端即复制方向由3’端向5’端延伸；由于DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向是从子链5’端向3’端延伸。

答案：C

☆综合应用

例3下列有关PCR描述，不正确的是（）

A.是一种酶促反应

B.引物决定了扩增的特异性

C.扩增产量按y＝（1＋X）n

D.扩增对象是氨基酸序列

E.扩增对象是DNA序列

解析：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原理，在引物的作用下使DNA聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝，其扩增产量为y＝（1＋X）n，y代表DNA片段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数，因此答案选D。

答案：D

★课余作业

1、PCR与生物体DNA复制有何区别？

2、如果在案件侦破过程中，只收集到一根毛发，但它所含的遗传信息太少，该怎么办呢？

★教学体会

教师在教学过程中，可以鲜引导学生回忆必修2的有关DNA复制的知识，在此基础上，学生可加深对于PCR原理的认识。对于PCR反应过程的教学，应以读图识图为主。教材中反应过程图解详细的描绘了参与PCR的各种组成成分；每一轮反应的三个基本步骤—变性、复性、延伸；每一步骤的作用。教师在教学中可以请学生在读图的同时，结合教科书中的文字说明来加深理解。当学生遇到难以理解的地方时，教师要及时给予解答。

第二节DNA片段的扩增——PCR技术

第二节DNA片段的扩增——PCR技术

[课标要求]

1．理解PCR的原理，讨论PCR应用。2．尝试PCR技术的基本操作。[知识梳理]

一．背景知识

1．细胞内DNA复制步骤：

（1）在作用下解开DNA双链

(2)在作用下，以DNA单链为模板，合成一段;（两条DNA模板链各需一个RNA引物）

(3)以RNA引物为起点，在作用下，以为原料，按照碱基互补配对原则合成两条新链。

2．聚合酶链式反应(PCR)概念;

。

3．PCR过程与细胞内DNA复制过程区别：

（1）引物是人工合成的单链，２０－３０个脱氧核苷酸，而不是RNA。

(2)解旋通过对反应的控制来实现而不依靠。

4．PCR过程：

(1)将PCR缓冲液、、一对引物、四种、DNA聚合酶、Mg2+等成分加入到特制的微量离心管中。

(2)高温变性：

。

(3)低温复性：

。

(4)中温延伸：

。

二．实践案例1．PCR实验虽然原理复杂，但操作十分简单，因为生物制剂公司已把PCR缓冲液、DNA聚合酶、脱氧核苷酸贮备液等组分配成了PCR试剂盒，实验人员仅需加入模板DNA及引物即可，所以快速、高效、灵活和易于操作是PCR技术的突出优点。2．材料用具略3．活动程序(1)加入各种试剂，混合，离心10s，放入PCR仪中。

(2)扩增循环，在PCR仪上设置好PCR热循环程序：

循环数

高温变性

低温复性

中温延伸

第一次

95℃,5min

55℃,1min

72℃,1min

30次

95℃,30s

55℃,30s

72℃,1min

最后一次

——

——

72℃,7min注：反应产物在4℃保存4．检测扩增效果（1）稀释样品10倍（2）以H2O作对照，在波长260nm处，将紫外分光光度计读数调到零。（3）加入到厚度为1cm的比色杯中，测定260nm处的光吸收值（4）DNA浓度（μg/mL）=（A260nm/0.02）×稀释倍数三．探究活动PCR实验虽然操作简单，但实验设备及药品价格较高，可以利用自己准备的简易材料，设计并进行PCR技术的模拟实验操作。四．PCR技术意义PCR能，从而有效地解决了因为样品中DNA含量而难以对样品进行分析研究的难题，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力，被广泛应用于、基因序列分析、遗传病诊断，古生物学研究以及形侦破案、亲子鉴定等。

五．小知识：

1．DNA的两条链是反向平行的，为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(-OH)末端称为5’端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链。但DNA合成的方向是从子链的5’端向3’端延伸。

2．引物是一段RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。用于PCR的引物长度通常为20—30个核苷酸。

3．在80C—100C的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。

[复习指导]

本节课复习要注重细胞内DNA复制过程和体外DNA片段的扩增——PCR技术的过程，运用DNA复制过程原理相同的方法，明确体外DNA片段的扩增——PCR技术在基因克隆、基因序列分析、遗传病诊断，古生物学研究以及形侦破案、亲子鉴定等方面的地位和作用。如何在体外创设细胞内DNA复制的条件是PCR技术的关键，细胞内的各种条件实际上是利用PCR仪来模拟的。PCR仪原理复杂，操作简单。

[典例解析]

1.PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，它们是（）

①PCR过程需要的引物是人工合成的DNA单链

②PCR过程不需要DNA聚合酶

③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的

④PCR过程中，DNA不需要解旋，直接以双链DNA为模板进行复制

A．①②③④B．①②C．①③D．②④

[解析]PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同。第一，PCR过程需要的引物不是RNA，而是人工合成的DNA单链，其长度通常为20－30个脱氧核苷酸。第二，PCR过程中，DNA解旋不依赖解旋酶，而是通过对反映温度的控制来实现的。

[答案]C。

2．在PCR扩增前，需要将下列哪些物质加入微量离心管中？（）

①模板DNA②模板RNA③DNA解旋酶④耐高温的DNA聚合酶⑤引物⑥PCR缓冲液⑦脱氧核苷酸贮备液⑧核苷酸贮备液

A．①④⑤⑥⑦B．①③④⑤⑥⑧

C．②③④⑤⑥⑦D．①④⑥⑦⑧

[解析]进行PCR过程前，将PCR缓冲液、DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸、DNA聚合、Mg2+等成分加入到一种特制的微量离心管中。

[答案]A

选修一生物5.1DNA的粗提取与鉴定学案（人教版）

一名优秀的教师在教学方面无论做什么事都有计划和准备，高中教师要准备好教案，这是教师工作中的一部分。教案可以让学生能够听懂教师所讲的内容，减轻高中教师们在教学时的教学压力。那么一篇好的高中教案要怎么才能写好呢？为满足您的需求，小编特地编辑了“选修一生物5.1DNA的粗提取与鉴定学案（人教版）”，欢迎您参考，希望对您有所助益！

课题1　DNA的粗提取与鉴定
1．尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取。
2．了解DNA的物理、化学性质。
3．理解DNA粗提取及DNA鉴定的原理。
一、提取DNA
1．提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法分离具有不同__________性质的__________。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与______、______和______等在__________性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
2．DNA粗提取主要利用了DNA的溶解性和耐受性两个方面
（1）利用DNA的溶解性。DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的________中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使______充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。
在________NaCl溶液浓度下，DNA的溶解度最小。
此外，DNA不溶于______溶液，但是细胞中的某些蛋白质能溶于其中。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。
（2）利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。蛋白酶能水解________，但是对______没有影响。大多数蛋白质不能忍受________℃的高温，而DNA在____℃以上才会变性。洗涤剂能够__________，但对DNA没有影响。
二、DNA的鉴定
在________的条件下，DNA遇________会被染成____色，因此________可以作为鉴定DNA的试剂。
三、实验设计
1．实验材料的选取
原则上，凡是含有______的生物材料都可以考虑，但是，选用__________________的生物组织，成功的可能性更大。
思考：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，他们用牛、羊、马血做提取DNA的实验材料合适吗？为什么？
2．破碎细胞，获取含DNA的滤液
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时用________搅拌，过滤后收集______即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用______溶解________。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的________和______，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集________。
3．去除滤液中的杂质
最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNA。
方案一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液物质的量浓度为________，过滤除去______的杂质；再调节NaCl溶液物质的量浓度为________，析出______，过滤去除________的杂质；再用物质的量浓度为________的NaCl溶液溶解DNA。
方案二：利用蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA的特点。在滤液中加入嫩肉粉，嫩肉粉中的__________能够分解蛋白质。
方案三：利用蛋白质和DNA的变性温度不同的特点。将滤液放在________℃的恒温水浴箱中保温10～15min，过滤获得DNA滤液。
4．DNA的析出与鉴定
将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积______的、冷却的________（体积分数为95%），静置2～3min，溶液中会出现__________，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒__________搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。
取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为________的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变____。
四、操作提示
1．以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g________，防止________。
2．加入洗涤剂后，动作要______、______，否则容易产生__________，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要______，以免加剧DNA分子的______，导致DNA分子不能形成________。
3．二苯胺试剂要________，否则会影响鉴定的效果。

答案：一、1.物理或化学　生物大分子　RNA　蛋白质　脂质　物理和化学
2．（1）NaCl溶液　DNA　0.14molL－1　酒精
（2）蛋白质　DNA　60～80　80　瓦解细胞膜
二、沸水浴　二苯胺　蓝　二苯胺
三、1.DNA　DNA含量相对较高
思考：不合适。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA，在实验中很难提取到。
2．蒸馏水　玻璃棒　滤液　洗涤剂　细胞膜　洗涤剂　食盐　研磨液
3．2molL－1　不溶　0.14molL－1　DNA　溶液中
2molL－1　木瓜蛋白酶　60～75
4．相等　酒精溶液　白色丝状物　沿一个方向　2molL－1　蓝
四、1.柠檬酸钠　血液凝固
2．轻缓　柔和　大量的泡沫　轻缓　断裂　絮状沉淀
3．现配现用
1.制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因
制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠，防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中的Ca2＋发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中的游离的Ca2＋大大减少，血液便不会凝固。因为鸡血中的红细胞和白细胞都有细胞核，DNA主要存在于细胞核中，所以在离心或静置沉淀后，用吸管除去上部的澄清液——血浆。
2．实验成功的关键及注意事项
（1）实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血的主要原因是遗传物质DNA主要存在于血细胞的细胞核内。
（2）盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。玻璃表面带电荷，鸡血细胞破碎以后释放出的DNA中的磷酸基也带电荷，因而容易被玻璃容器吸附，提取到的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，可以减少提取过程中DNA的损失。
（3）破碎细胞，释放DNA过程中，若是血细胞液，加水后必须充分搅拌，否则血细胞核不会充分破碎，溶解出的DNA量就会减少；若是植物细胞，需先用洗涤剂溶解细胞膜。
（4）洗涤剂是多组分的混合物，在严格的科学实验中很少使用。实验室提取高纯度的DNA时，通常使用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、十二烷基硫酸钠（SDS）或吐温等化学试剂。
（5）实验过程中两次加入蒸馏水，操作目的各不相同：第一次向鸡血细胞液中加蒸馏水，目的是使血细胞通过吸水涨破，释放出核内的DNA。第二次向溶有DNA的滤液中加蒸馏水，目的是稀释NaCl溶液，使其浓度降至0.14molL－1，最终使大量DNA析出。
（6）实验过程中几次过滤的目的：制备鸡血细胞液时过滤的目的是除去破裂的细胞膜等物质；在去杂时，将溶有DNA的高浓度NaCl溶液过滤的目的是除去不溶于NaCl溶液的杂质；去杂时，用低浓度NaCl溶液析出DNA后过滤的目的是除去溶于NaCl溶液中的杂质。
过滤时采用单层纱布或尼龙布，不能使用滤纸，以减少DNA的损失。
（7）提取DNA丝状物用玻璃棒搅拌时，要缓缓沿一个方向搅拌，而且不能直接触碰烧杯壁，以便获得较完整的DNA分子。
（8）用冷酒精浓缩和沉淀DNA时，所用的体积分数为95%的酒精必须充分预冷才能使用，冷酒精与含有DNA的氯化钠溶液的体积比是1∶1。
低温可抑制核酸水解酶的活性，防止降解DNA；低温可降低分子的运动，易于形成沉淀析出；低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。
（9）鉴定实验所得的丝状物的主要成分是DNA，可用二苯胺做鉴定试剂，鉴定出现蓝色，说明实验基本成功，如果不出现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误。
3．蛋白质提取与DNA提取的比较
蛋白质提取难度大。因为与DNA相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有一种统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件，设计特定的方法。
题型一DNA提取、分离与鉴定原理
现代生物学已向两个方面发展，宏观研究的水平为生态系统水平，微观研究的水平为分子水平，对于分子的研究，其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是关于DNA分子的提取和分离的相关问题，请回答。
（1）在提取菜花细胞中的DNA时，采用的是研磨法，为什么不能像用鸡血那样，用蒸馏水使其破裂？
（2）在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，说明其作用。
①2molL－1NaCl溶液：_____________________________________________________。
②0.14molL－1NaCl溶液：____________________________________________________。
（3）在整个操作过程中，每100mL血液中加入3g柠檬酸钠的作用是________________
_________________________________________________。
（4）鉴定DNA所用的试剂是__________________________________________________。
解析：（1）DNA分子提取中理想的材料为富含DNA的细胞，动物中鸡血红细胞具有细胞核，放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA，而植物细胞中含有细胞壁，不能因吸水而涨破。（2）实验过程中两次用到NaCl溶液，初次为2molL－1NaCl溶液，用于溶解DNA，而0.14molL－1NaCl溶液会使DNA析出。（3）为了防止凝血现象的发生应加入柠檬酸钠。（4）鉴定DNA所用的试剂为二苯胺试剂。
答案：（1）植物细胞具有细胞壁，不会吸水涨破，只有通过研磨，才能释放出DNA。
（2）①溶解DNA分子，过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质　②使DNA分子析出，过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质
（3）防止出现凝血现象
（4）二苯胺试剂
反思领悟：在NaCl溶液浓度低于0.14molL－1时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在0.14molL－1时，DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大。
题型二DNA粗提取与鉴定实验中的操作
（2010江苏高考）某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于－20℃条件下保存24h。
DNA粗提取：
第一步，将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。
第二步，先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步，取6支试管，分别加入等量的2molL－1NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：
材料保存温度花菜辣椒蒜黄
20℃＋＋＋＋＋＋
－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋
（注：“＋”越多表示蓝色越深）
分析上述实验过程，回答下列问题。
（1）该探究性实验课题名称是_________________________________________________。
（2）第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少________。
（3）根据实验结果，得出结论并分析。
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量较多。
结论2：__________________________________________________________________。
②针对结论1，请提出合理的解释：__________________________________________。
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是_____________________________________________________________________
______________________________，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
解析：（1）分析表格可知，实验目的在于探究材料的不同和保存温度的不同对DNA提取量的影响。
（2）DNA分子为链状，很容易断裂，所以应缓缓地向一个方向搅拌。
（3）分析表格可看出，同种材料在－20℃时DNA提取量较多，不同材料在同种温度下保存时，蒜黄的DNA提取量最多。低温下酶活性较低，DNA降解慢。
（4）根据题意，可用氯仿将DNA溶液中的蛋白质析出，进一步提高DNA的纯度。
答案：（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
（2）DNA断裂
（3）①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多　②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢
（4）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液
1．DNA在下列哪一浓度的NaCl溶液中，溶解度最低？（）
A．2molL－1B．0.015molL－1C．0.14molL－1D．5molL－1
2．若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是（）。
A．利于DNA的溶解B．分离DNA和蛋白质C．溶解细胞膜D．溶解蛋白质
3．在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（）。
A．不易破碎B．减少DNA的损失C．增加DNA的含量D．容易刷洗
4．在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是（）。
①0.1gmL－1的柠檬酸钠溶液　②2molL－1的NaCl溶液　③0.14molL－1的NaCl溶液　④体积分数为95%的酒精溶液　⑤0.015molL－1的NaCl溶液
A．①③⑤B．③④C．②④D．②③④

答案：1．C　DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14molL－1时，溶解度最低。
2．C　洗涤剂是一种离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。
3．B　DNA易黏附于玻璃管上，造成DNA量的损失。
4．B　初步析出DNA和提取纯净的DNA所用的药品和浓度分别是0.14molL－1NaCl溶液和体积分数为95%的酒精溶液。

选修一生物4.2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果学案（人教版）

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课题2　探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
1．说出加酶洗衣粉的洗涤原理。
2．探讨温度对加酶洗衣粉洗涤的影响。
3．探讨不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的区别。
一、基础知识
1．加酶洗衣粉是指含有________的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：________、________、淀粉酶和__________。其中，应用最广泛、效果最明显的是____________和____________。
2．____________能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的________或____________。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶能分别将大分子的______、______和________水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。
3．影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有______、________和____________。
二、实验设计
实验设计遵循的原则是单一变量原则和对照原则，比如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同时，以加酶、普通洗衣粉为变量，其他条件完全一致；同时普通洗衣粉处理污渍物与加酶洗衣粉处理污渍物形成对照实验。
思考：小华同学想用含有蛋白酶的洗衣粉洗涤妈妈送给她的真丝围巾，你认为她这样做合适吗？为什么？

答案：一、1.酶制剂　蛋白酶　脂肪酶　纤维素酶　碱性蛋白酶　碱性脂肪酶
2．碱性蛋白酶　氨基酸　小分子的肽　脂肪　淀粉　纤维素
3．温度　酸碱度　表面活性剂
二、思考：不合适，因为丝绸的主要成分是蛋白质，它会被洗衣粉的蛋白酶分解，损坏围巾。
1．加酶洗衣粉
加酶洗衣粉是在合成洗衣粉中，加入0.2%～0.5%的酶制剂制成的。在洗衣粉中添加的酶的种类很多，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等。我国在洗衣粉中添加的酶最主要的是碱性蛋白酶。这种酶能耐碱性条件，而且耐贮存，对皮肤、衣物没有刺激和损伤作用。碱性蛋白酶能使蛋白质水解成可溶于水的多肽和氨基酸。衣物上附着的血渍、汗渍、奶渍、酱油渍等污物，都会在碱性蛋白酶的作用下，结构松弛、膨胀解体，稍加搓洗，污迹就会从衣物上脱落。
使用加酶洗衣粉时必须注意以下几点：（1）碱性蛋白酶能使蛋白质水解，因此，蛋白质类纤维（羊毛、蚕丝等）织物就不能用加酶洗衣粉来洗涤，以免使纤维受到破坏；（2）使用加酶洗衣粉时，必须注意洗涤用水的温度。碱性蛋白酶在35～50℃时活性最强，在低温下或70℃以上就会失效；（3）加酶洗衣粉也不宜长期存放，存放时间过长会导致酶活性损失；（4）加酶洗衣粉不宜与三聚磷酸盐共存，否则酶的活性将会丧失；（5）添加了碱性蛋白酶的洗衣粉可以分解人体皮肤表面蛋白质，而使人患过敏性皮炎、湿疹等，因此，应避免与这类洗衣粉长时间地接触。
酶不能直接添加到洗衣粉中，因为洗衣粉中的表面活性物质会降低酶的活性。因而科学家将基因工程生产出的酶用特殊水溶性物质包裹起来，与洗衣粉的其他成分隔离开来。加酶洗衣粉可以降低表面活性剂和三聚磷酸钠的用量，使洗涤剂朝低磷、无磷的方向发展。
2．普通洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的异同
普通洗衣粉加酶洗衣粉
相同点表面活性剂可以产生泡沫，可以将油脂分子分散开；水软化剂可以分散污垢；等等
不同点酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物，小分子有机物易溶于水，从而与纤维分开
题型一加酶洗衣粉去渍原理
酶制剂中含有蛋白酶，不含有肽酶的原因是（）。
A．肽酶制备成本太高
B．肽酶会影响蛋白酶活性
C．衣物上的大分子蛋白质变为多肽后已很容易脱落
D．蛋白酶把蛋白质全水解成可溶性氨基酸
解析：考虑衣物的实际洗涤情况，当加酶洗衣粉中的蛋白酶将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成小分子多肽后，已经很容易从衣物上脱落了，无需再加肽酶。
答案：C
反思领悟：蛋白酶催化蛋白质分解成多肽，溶于水易脱落。
题型二加酶洗衣粉与普通洗衣粉的比较
下列关于加酶洗衣粉说法中，不正确的是（）。
A．加酶洗衣粉的效果总比普通洗衣粉的效果好
B．加酶洗衣粉效果的好坏受很多因素影响
C．加酶洗衣粉中目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶
D．加酶洗衣粉与普通洗衣粉相比更利于环保
解析：加酶洗衣粉与普通洗衣粉相比，虽然表面活性剂和三聚磷酸钠的含量较少，但添加了一定量的酶制剂。在酶的作用下，构成污渍的一些生物大分子被分解为可溶性的小分子，使污渍容易从衣物上脱落，即加酶洗衣粉的洗涤效果不仅没有降低，反而加强了。但是，由于酶具有专一性，只有洗衣粉中的酶与污渍相对应时，其优势才能发挥出来，如果不对应，加酶洗衣粉的洗涤效果可能不如普通洗衣粉。
答案：A
题型三影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素及实验设计原则
从土壤的嗜碱性短小芽孢杆菌中首先分离选育到一株产生低温型碱性蛋白酶的高产菌株。该菌株具有嗜碱性强、不易染菌、生产性状稳定等特点。该菌株产碱性蛋白酶能力强，在全国5种碱性蛋白酶的性能比较中，该蛋白酶在28℃下所占有酶活力比例高于同类产品，表明具有低温型酶的特性。该产品用于加酶洗衣粉，可提高去污力1～2倍，尤其在常温下对血渍、奶渍等蛋白质污垢有专一性的去污效果。
根据以上材料回答下列问题。
（1）为什么该菌株产的碱性蛋白酶的活性在不同温度下不同？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（2）试分析该产品在常温下对血渍、奶渍等蛋白质污垢有专一性的去污效果的原因。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（3）若要比较添加该蛋白酶的洗衣粉与普通洗衣粉的洗涤效果，应注意控制实验变量，请列举均衡无关变量的措施（至少三条）。
①________________________________________________________________________；
②________________________________________________________________________；
③________________________________________________________________________。
（4）在日常生活中使用洗衣粉时，有人先用沸水溶解洗衣粉再浸泡衣物，该种方法能否用于题目中所说的加酶洗衣粉？为什么？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析：（1）酶的活性受温度影响，最适温度下酶的活性最高。（2）酶具有专一性特点，一种酶只能催化一种或一类化学反应，血渍、奶渍的主要成分为蛋白质，蛋白酶能分解蛋白质，但不能分解其他成分。（3）实验设计方案中要考虑控制变量，以减少实验误差，增强实验可信度。控制变量可从酶作用的底物、作用的时间及作用的条件等方面采取措施。（4）加酶洗衣粉中的酶的本质是蛋白质，遇沸水会变性失活从而失去催化蛋白质类污垢分解的功能。
答案：（1）酶作为生物催化剂，其活力受温度影响，在最适温度下酶的活性最强
（2）酶具有专一性的特点，即一种酶只能催化一种或一类化学反应，所以蛋白酶只能将血渍、奶渍等蛋白质污垢分解，对其他类型污垢不起作用
（3）①两种洗衣粉的用量相同　②被洗涤的布料及污渍状态相同　③洗涤时所用水量及温度（一般为常温）相同　④浸泡和洗涤的时间相同（答出三条即可）
（4）不能。因为加酶洗衣粉中的酶的成分为蛋白质，遇高温会变性失活而失去催化功能
1．加酶洗衣粉中含有的常见酶类为（）。
A．蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶B．脂肪酶、肽酶、淀粉酶、纤维素酶
C．蛋白酶、脂肪酶、肽酶、纤维素酶D．蛋白酶、淀粉酶、麦芽糖酶、肽酶
2．下列关于加酶洗衣粉的叙述，正确的是（）。
A．加酶洗衣粉是指仅加入蛋白酶的洗衣粉
B．加酶洗衣粉里的酶制剂对人体有毒害作用
C．加酶洗衣粉里的酶制剂污染环境
D．加酶洗衣粉是含有酶制剂的洗衣粉
3．关于加酶洗衣粉，以下说法错误的是（）。
A．洗衣粉中的蛋白酶对人体皮肤有损伤
B．洗衣粉中的蛋白酶对皮肤和所有衣物无刺激作用
C．使用加酶洗衣粉时要特别注意水温
D．加酶洗衣粉有保质期
4．在探讨不同温度对加酶洗衣粉的影响实验中，下列说法不正确的是（）。
A．应根据当地一年中实际气温变化来确定水温
B．可选择洗涤不同污渍的白布作对照
C．选择水温应考虑衣物的承受能力
D．选择水温应考虑洗涤成本

答案：1．A　加酶洗衣粉中常见酶类为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，分别分解衣物中难以分解的相应污物。
2．D　加酶洗衣粉中的酶为酶制剂，而不是蛋白酶；对人体无毒害作用，且一般不会污染环境。
3．B　皮肤上有蛋白质成分，有些衣物和丝绸等也有蛋白质成分，可被加酶洗衣粉中的蛋白酶水解。
4．B　探讨不同温度对加酶洗衣粉的影响实验中，温度是唯一变量，其他各条件应适宜且保持不变。所以实验中白布的污渍种类和程度应完全相同。